給予動(dòng)物鼠籠傾斜、潮濕墊料、高溫、噪音、束縛、電擊、游泳、晝夜節(jié)律顛倒等不同刺激因子，且刺激因子安排為多變性和不可預(yù)測(cè)，可誘導(dǎo)性是模型制造成功的關(guān)鍵。該模型被廣泛用于抑郁癥神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制及抗抑郁藥物的研究，以及伴發(fā)的焦慮、學(xué)習(xí)記憶障礙及防護(hù)藥物研究。

本研究中，通過(guò)水迷宮實(shí)驗(yàn)、避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看CUMS模型組水迷宮尋臺(tái)潛伏期顯著性延長(zhǎng)，避暗錯(cuò)誤次數(shù)顯著性增加、避暗潛伏期顯著性減少等，這些行為學(xué)結(jié)果，提示大小鼠CUMS模型成功。此外本實(shí)驗(yàn)還對(duì)CUMS模型的機(jī)制進(jìn)行了基礎(chǔ)研究，認(rèn)為CUMS模型會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物皮層的5-HT、DA、Ach、NE等神經(jīng)遞質(zhì)水平顯著性降低（P<0.05）。因此我們認(rèn)為采用慢性不可預(yù)測(cè)應(yīng)激，35天可以造成大鼠和小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙。

模型技術(shù)難點(diǎn)在于對(duì)于CUMS刺激因子的選擇，刺激因子的選擇可能影響實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷某晒εc否，常用的刺激因子有禁食(12 h)、禁水(12 h)、冷水游泳(4 °C，5 min)、熱水游泳(42 °C，5 min)、動(dòng)物叫聲(0.5 h)、束縛(使用自行研發(fā)的小鼠行為限制器，長(zhǎng)20 cm，直徑7 cm)、晝夜顛倒、配對(duì)飼養(yǎng)、濕籠、傾籠等。每日選擇2~3 種刺激，并盡量使應(yīng)激程序符合不可預(yù)測(cè)的特點(diǎn)，以避免動(dòng)物產(chǎn)生適應(yīng)性。相同的刺激因子應(yīng)該隔3-7日再進(jìn)行。

本研究通過(guò)不同的刺激因子對(duì)老鼠造成慢性不可預(yù)測(cè)應(yīng)激模型，通過(guò)水迷宮、避暗等經(jīng)典行為學(xué)指標(biāo)，以及5-HT、DA、Ach、NE等神經(jīng)遞質(zhì)基礎(chǔ)機(jī)制指標(biāo)，表明了慢性不可預(yù)測(cè)應(yīng)激誘導(dǎo)老鼠學(xué)習(xí)記憶損傷模型的成功，并且該模型對(duì)于大小鼠具有相同的效果，本模型可用于進(jìn)一步的改善學(xué)習(xí)記憶藥物的藥效學(xué)評(píng)價(jià)。

本實(shí)驗(yàn)采用健康成年SPF級(jí)老鼠。飼料墊料均為高壓滅菌產(chǎn)品，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，動(dòng)物用水均經(jīng)過(guò)除菌處理。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以完整的包裝直接進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，觀察適應(yīng)5天后無(wú)異常情況，方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中動(dòng)物操作均符合動(dòng)物倫理學(xué)規(guī)范，對(duì)環(huán)境和生態(tài)影響等符合國(guó)家相關(guān)法律規(guī)定。

在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活的猴中，8個(gè)攜帶PINK1突變（M），3個(gè)是野生型（WT）。然而，三只突變猴（M1，M3和M4）是新生三胞胎，它們?cè)诔錾?-4天內(nèi)難以存活并死亡。一只WT新生猴也死亡。另一只突變猴（M2）在出生后7天死亡，沒(méi)有明顯的癥狀。其他三只突變猴（M6，M7和M8）已經(jīng)存活了三年;然而，M5減少了食物攝入并在1.5年時(shí)顯示出虛弱狀態(tài)，并且在麻醉后30天死于MRI檢查。

對(duì)于存活時(shí)間較短的猴，研究人員發(fā)現(xiàn)在M1皮質(zhì)和紋狀體以及M2皮質(zhì)中約65％-70％的PINK1等位基因攜帶～7.2kb缺失。 PINK1突變猴腦的蛋白質(zhì)印跡分析也證實(shí)了PINK1，神經(jīng)元蛋白（NeuN，PSD95，CRMP2和SNAP25）和雙皮質(zhì)素（DCX）的不同程度的缺陷。對(duì)于活猴，MRI和視頻監(jiān)測(cè)研究顯示，具有PINK1突變的1.5歲成年猴顯示皮質(zhì)中的灰質(zhì)密度顯著降低。盡管睡眠行為沒(méi)有改變，M5和M6猴子也表現(xiàn)出運(yùn)動(dòng)減少。 對(duì)M6猴腦基因組DNA的分析也顯示PINK1外顯子2和外顯子4在各種組織中的大量缺失，并且蛋白質(zhì)印跡分析顯示皮質(zhì)和黑質(zhì)中PINK1表達(dá)與年齡相比顯著降低。

通過(guò)對(duì)該模型的研究，能更好地了解帕金森病的病因，發(fā)病機(jī)制，病理特征以及預(yù)防和治療。

在人類，PINK1突變導(dǎo)致常染色體隱性遺傳和早發(fā)性帕金森病（PD）并伴有選擇性神經(jīng)變性。雖然已經(jīng)在小鼠及豬產(chǎn)生了相關(guān)的疾病模型，但是這些模型并不能概括在PD患者中看到相關(guān)的神經(jīng)變性，這意味著PINK1在哺乳動(dòng)物大腦中的功能需要使用更接近人類的較大動(dòng)物進(jìn)行評(píng)估。

PINK1基因缺失恒河猴存在神經(jīng)變性的表現(xiàn)，且觀察到的顯著神經(jīng)元丟失，揭示了PINK1在靈長(zhǎng)類大腦中的關(guān)鍵功能，并將提供一個(gè)新的研究PINK1的多種功能和與PINK1功能障礙相關(guān)的發(fā)病機(jī)制的工具。

帕金森病（Parkinson′s disease，PD）是一種常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，老年人多見(jiàn)，平均發(fā)病年齡為60歲左右，40歲以下起病的青年帕金森病較少見(jiàn)。我國(guó)65歲以上人群PD的患病率大約是1.7%。大部分帕金森病患者為散發(fā)病例，僅有不到10%的患者有家族史。帕金森病最主要的病理改變是中腦黑質(zhì)多巴胺（dopamine, DA）能神經(jīng)元的變性死亡，由此而引起紋狀體DA含量顯著性減少而致病。導(dǎo)致這一病理改變的確切病因目前仍不清楚，遺傳因素、環(huán)境因素、年齡老化、氧化應(yīng)激等均可能參與PD多巴胺能神經(jīng)元的變性死亡過(guò)程。

帕金森發(fā)病多集中于中老年人，中老年人由于其人體機(jī)能的下降，總或多或小的伴有各種癥狀，如若不能很好的帕金森早期癥狀有個(gè)大概的了解，往往會(huì)出現(xiàn)誤診，延誤病情的情況。曾經(jīng)就有陳某，在很長(zhǎng)時(shí)間之前便出現(xiàn)左手不靈活，不經(jīng)意間手會(huì)顫抖的現(xiàn)象，腿腳也會(huì)不聽(tīng)指揮。但在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院就診時(shí)，卻被認(rèn)為是頸椎病。結(jié)果治了半年都不見(jiàn)效，反而繼續(xù)惡化。為了防止這樣的事情再次發(fā)生，我們就有必要增進(jìn)對(duì)帕金森早期癥狀的了解，從而爭(zhēng)取能夠做到很好的預(yù)防。

（1）抖——靜止性震顫

震顫是該病的基本特征之一，震顫首先出現(xiàn)于肢體的遠(yuǎn)端，通常會(huì)出現(xiàn)單側(cè)手指搓丸樣運(yùn)動(dòng)，其后會(huì)發(fā)展為同側(cè)下肢和對(duì)側(cè)肢體在靜止時(shí)出現(xiàn)不自主的有節(jié)律顫抖，變換位置或運(yùn)動(dòng)時(shí)，癥狀可減輕或停止。震顫會(huì)隨情緒變化而加劇。

（2）僵——肌肉僵直

早期多從單側(cè)肢體開(kāi)始，患者感覺(jué)關(guān)節(jié)僵硬及肌肉發(fā)緊。影響到面肌時(shí)，會(huì)出現(xiàn)表情呆板的“面具臉”；影響到軀干、四肢及膝關(guān)節(jié)屈曲的“三曲姿勢(shì)”。指間關(guān)節(jié)伸直，手指內(nèi)收，拇指對(duì)掌，這也是震顫麻痹的特殊手姿。

（3）慢——行動(dòng)遲緩

早期患者上肢的精細(xì)動(dòng)作變慢，如系鞋帶、扣紐扣等動(dòng)作比以前緩慢許多，甚至無(wú)法順利完成。行走時(shí)起步困難，一旦開(kāi)步，身體前傾，步伐小而越走越快，不能及時(shí)停步，即“慌張步態(tài)”。

（4）鈍——思維及智能障礙

抑郁可為首發(fā)癥狀，其常見(jiàn)癥狀如思維緩慢、空間視覺(jué)障礙、轉(zhuǎn)移注意力困難、記憶力缺損和執(zhí)行命令差。

（5）合并其他癥狀

有時(shí)患者還會(huì)合并出現(xiàn)語(yǔ)言減少和聲音低沉單調(diào)、吞咽困難、流涎、睡眠障礙、抑郁或癡呆等癥狀。

在了解帕金森綜合癥的早期癥狀以及做好預(yù)防護(hù)理之外，對(duì)于帕金森患者還要盡早的進(jìn)行帕金森的治療，然而目前治療帕金森療效最好的方法就是生物細(xì)胞療法，該療法治療帕金森疾病主要是通過(guò)生物細(xì)胞的輸入，生物細(xì)胞會(huì)在帕金森氏病患者腦部直接修復(fù)受損的腦組織細(xì)胞，恢復(fù)腦組織的正常功能，從而從根本上糾正不正常的腦部病理改變。對(duì)帕金森的三大癥狀都會(huì)有非常明顯的改善，并且可以提高患者的體質(zhì)，提高生存質(zhì)量。