主動脈瘤的發(fā)病率在老年人群中可以高達5-10%，胸主動脈瘤的患病率占主動脈瘤的20.3%～37%。但是關于胸主動脈瘤的動物模型較少。在多種方法誘導的腹主動脈瘤模型中，胸主動脈瘤的發(fā)病率較低。

與CaCl2誘導的模型、脫細胞主動脈移植模型、囊狀動脈瘤動物模型，AngII誘導等動物模型相比，BAPN誘導的動物模型的優(yōu)點如下：1）操作簡單，不需要手術，使用的是3月齡C57BL/6J小鼠，而不是基因工程小鼠；2）相較于傳統(tǒng)的BAPN飲水，灌胃給藥方式更穩(wěn)定，給藥劑量更可控；3)成瘤率高，大約85%，成瘤部位主要集中在胸主。該法造模的特點：大體及超聲檢測能夠發(fā)現(xiàn)主動脈直徑增厚超過50%；夾層瘤部冰凍切片HE 染色可見主動脈擴張現(xiàn)象嚴重，纖維化加劇，彈力纖維斷裂，將可進一步應用于胸主動脈瘤疾病的手術和藥物研發(fā) 。

動物模型制備過程中，由飼養(yǎng)人員進行日常飼喂，由獸醫(yī)進行監(jiān)督管理，造模期間動物狀態(tài)良好，每天記錄病死只數(shù)，造模選用按動物體重確定灌胃劑量，對動物傷害小，每周稱重一次，未使用微生物，對環(huán)境沒有影響，造模方法簡便易，行重復性好，不可遺傳。

1.大體結構觀察胸主動脈夾層瘤，超聲觀察夾層瘤直徑。

大體結構顯示，BAPN給藥組胸主動脈處有明顯的瘤狀突起。超聲結果顯示BAPN誘導胸主動脈瘤組，給藥四周后，胸主動脈直徑超過對照組直徑的50%，認為造模成功。

2.夾層瘤冰凍切片HE染色

HE染色結果顯示，和對照組相比，BAPN誘導組小鼠胸主動脈節(jié)段出現(xiàn)彈力纖維降解，細胞外基質沉積和炎癥細胞增多的現(xiàn)象。

胸主動脈瘤(aortic aneurysm) 常發(fā)生在升主動脈主動脈弓、胸部降主動脈， 主動脈壁局部或彌漫性的異常擴張超過正常值 50%以上，壓迫周圍器官而引起癥狀。

小鼠胸主動脈瘤模型：瘤體發(fā)生部位為胸主動脈，主動脈直徑擴張程度，病理特征為炎細胞浸潤，彈力纖維降解。

1 實驗材料

實驗動物 選擇健康雄性C57小鼠，3周齡，體質量10-15g，均購于北京華阜康華生物科技股份有限公司。飼養(yǎng)于中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所動物中心動物房內(nèi)，5只/盒屏障系統(tǒng)中，溫度( 22±2) ℃，濕度50%～60%，12 h 循環(huán)照明，小鼠自由攝取食、水，IACUC號：ILAS-YZW17007。

2 方法

2.1 動物模型制備

BAPN用水溶解成50mg/ml的儲存液。C57BL/6J小鼠根據(jù)體重，按1g/kg/d的劑量進行BAPN灌胃，4周，每周測量體重一次，根據(jù)體重變化，調(diào)整給藥量。

2.2 標本采集及處理

完成灌胃四周后，稱體重，麻醉后腹主動脈采血至死亡，室溫靜置2h后于4℃3000r離心10分鐘提取血清，-80℃冰箱凍存。取心臟、主動脈做石蠟切片，10%中性福爾馬林中固定，30%蔗糖脫水，冰凍切片包埋劑包埋并切片；進行免疫組化及免疫熒光檢測，其余血管組織液氮冷凍-80℃保存，提取蛋白進行免疫印跡檢測。

一、疾病概述

主動脈瘤(aortic aneurysm) 指主動脈壁局部或彌漫性的異常擴張超過正常值 50%以上，壓迫周圍器官而引起癥狀，常發(fā)生在升主動脈主動脈弓、胸部降主動脈、胸腹主動脈和腹主動脈，其發(fā)病率在老年人群中可以高達5-10%，并呈上升趨勢。主動脈瘤可由多種因素引起，如家族遺傳、高血壓、動脈硬化等，其主要病理改變?yōu)檠鼙趶椓w維斷裂及平滑肌細胞病變和血管外膜膠原沉積。主動脈瘤根據(jù)發(fā)病位置可分為胸主動脈瘤和腹主動脈瘤。胸主動脈瘤發(fā)生在所有年齡段的人，沒有性別關聯(lián)，并且與遺傳因素高度相關。相反，腹主動脈瘤的發(fā)生與年齡，性別，動脈粥樣硬化和吸煙有關，但與遺傳關聯(lián)較弱。

約80%的胸主動脈瘤是繼發(fā)于高血壓病動脈粥樣硬化，14%是由于梅毒引起，其他的原因包括先天新因素、馬方綜合征及胸部頓挫傷。大多發(fā)生于60歲以后，男女之比為10：2。胸主動脈瘤的患病率占主動脈瘤的20.3%～37%。

本病發(fā)病緩慢，早期多無癥狀和體征，至后期由于動脈瘤壓迫周圍組織而產(chǎn)生癥狀，其臨床表現(xiàn)由于動脈瘤的大小、形狀、部位和生長方向而有不同。胸主動脈瘤的手術療法在時間的選擇上仍然受多種因素影響。目前也是以手術干預為主，沒有有效的藥理治療方法，構建小鼠胸主動脈瘤動物模型為胸主動脈瘤發(fā)病機制的研究和藥物評價研究提供支撐。

二、研究背景

1、造模因素信息

BAPN誘導小鼠胸主動脈瘤模型

2、實驗動物背景信息

3周齡C57BL/6J小鼠

3、研究背景

該動物模型的研究目的及意義；該動物模型的國內(nèi)外研究進展并附參考文獻。

主動脈瘤動物模型是研究人主動脈瘤的重要工具，對闡釋主動脈瘤的病理生理學機制、研發(fā)和評價主動脈瘤的治療藥物都具有重要意義。當前關于腹主動脈瘤的動物模型有很多，也比較成熟，但是關于胸主動脈瘤的動物模型較少。在多種方法誘導的腹主動脈瘤模型中，雖有胸主動脈瘤的發(fā)生，但胸主動脈瘤的發(fā)病率較低。當前應用最廣泛的主動脈瘤動物模型包括彈性蛋白酶誘導的模型、CaCl2誘導的模型、脫細胞主動脈移植模型、囊狀動脈瘤動物模型，AngII誘導的動物模型、醛固酮受體激動劑加高鹽誘導的動物模型、基因編輯的動脈瘤動物模型 [1-6]。而β-氨基丙腈（BAPN）誘導的動物模型則是最近幾年發(fā)現(xiàn)的一種新的誘導胸主動脈瘤的方法[7]。 BAPN是賴氨酰氧化酶（Lox）的強大抑制劑，Lox是由血管平滑肌細胞釋放的一種酶，參與前膠原和原彈性蛋白的共價連接，產(chǎn)生不溶物原纖維[8]。Lox通過調(diào)控不溶性ECM在血管發(fā)育中起關鍵作用。小鼠中Lox基因組失活可導致動脈瘤的形成[9-10]。該模型的優(yōu)點如下：1）操作簡單，不需要手術，使用的是3月齡C57BL/6J小鼠，而不是基因工程小鼠；2）相較于傳統(tǒng)的BAPN飲水，灌胃給藥方式更穩(wěn)定，給藥劑量更可控；3)成瘤率高，大約85%，成瘤部位主要集中在胸主。

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